YO-PRO-1/PI细胞凋亡与坏死检测试剂盒

YO-PRO-1/PI细胞凋亡与坏死检测试剂盒(Apoptosis and Necrosis Detection Kit with YO-PRO-1and PI)，简称YP1/PI细胞凋亡与坏死检测试剂盒，是一种基于DNA绿色荧光染料YO-PRO-1 (YP1)和红色荧光染料碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)的双荧光法检测细胞凋亡和坏死的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪及其它荧光检测系统。

YO-PRO-1，又名恶唑黄(Oxazole yellow)，简称YP1，是一种对正常动物细胞膜没有通透性而对于凋亡细胞的细胞膜有通透性的DNA绿色荧光染料，常用于细胞凋亡的检测。YO-PRO-1是一种非细胞膜穿透性的并对DNA具有高亲和力的羰花青单体绿色荧光染料，在没有与DNA结合的时候基本上没有荧光，而与DNA结合后可以发出明亮的绿色荧光。在细胞凋亡发生时，细胞膜通透性发生改变，此时YO-PRO-1可以进入细胞内与DNA结合，发出明亮的绿色荧光，因此常使用本荧光染料用于分析和鉴定凋亡细胞。需要注意的是YO-PRO-1也能染色坏死细胞，因此需要和对坏死细胞特异性荧光染色的PI进行双染才能有效判定细胞凋亡。

PI，即碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸红色荧光染料，只能染色细胞膜完整性丧失的坏死细胞，并与核酸结合发出明亮的红色荧光。因此， YO-PRO-1与碘化丙啶(PI)联合使用，可以同时进行凋亡细胞和坏死细胞的检测，凋亡细胞呈现绿色荧光，坏死细胞同时呈现红色和绿色荧光阳性，活细胞很少或几乎没有荧光。

细胞死亡包括凋亡(apoptosis)、坏死(necrosis)、焦亡(pyroptosis)等多种形式。其中受调控的细胞死亡被称为程序性细胞死亡(programmed cell death, PCD)。程序性细胞死亡包括凋亡、细胞程序性坏死(programmed necrosis)或坏死性凋亡(necroptosis)和焦亡等。从细胞膜的完整性角度来看，凋亡的特征是细胞膜的完整性会保留，而坏死的特征是细胞膜的完整性会丧失。

细胞凋亡是生物体发育等生命过程中普遍存在的、由基因决定的细胞主动有序的死亡方式。当细胞遇到内、外环境因子刺激时，启动基因调控的保护措施，去除体内非必需细胞或即将发生特化的细胞。在这一过程中，细胞脱落离体或裂解为若干凋亡小体，并迅速被巨噬细胞或邻近细胞清除，不会导致炎症反应，这是一种由基因控制、高度有序的细胞自主死亡，包含一系列信号事件组成的通路。细胞凋亡的主要特征包括细胞膜保持完整、细胞膜磷脂酰丝氨/酸外翻(Annexin V染色阳性)、基因组DNA片段化(DNA fragmentation) (即产生DNA ladder并且TUNEL染色阳性)、电镜或荧光染色时细胞核碎裂或致密浓染、Caspase 3等激活、线粒体膜电位下降从线粒体内释放等。

坏死通常被认为是一种偶发性的并且是被动的细胞死亡，如物理性或化学性的损害因素及缺氧与营养不良等都可以导致细胞坏死。坏死细胞初期细胞膜通透性增高，致使细胞肿胀，细胞器变形或肿大，早期细胞核无明显形态学变化，最后细胞破裂，细胞膜丧失完整性，释放出细胞内容物，并常引起炎症反应，但不会出现细胞凋亡或自噬标志物。通常，凋亡对生命体是有利的，而坏死很可能是有害甚至是致命的。凋亡的晚期也可以发生继发性坏死(secondary necrosis)。受细胞程序性调控的坏死(programmed necrosis)被称为necropotosis。

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