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透析袋如何选择与使用
  • 发布日期:2020-04-21      浏览次数:191
    • 一、透析

      透析就是利用小分子能够通过,而大分子不能够通过半透膜的原理,将大小分子量物质分开的一种实验手段;在膜两侧存在浓度差时,溶质从高浓度的一侧(通常是样品置于透析袋中)扩散通过半透膜到低浓度的一侧(透析溶液一侧)直至膜两边浓度达到平衡。如下图所示:

      利用透析分离物质的优缺点:

      优点:样品回收率高;操作简单,无需繁琐准备工作;成本低廉,可一次性使用;分离条件温和;无需监控

      缺点:耗时较长(24-48小时);要求较为明显的样品和杂质之间的分子量差(1-2个数量级)。

      二、三种不同类型的透析袋

      1、普通型透析袋

      (1)把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段;

      (2)在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟;

      (3)用蒸馏水彻底清洗透析袋;

      (4)放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟;

      (5)冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套;

      (6)用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净;

      2. 再生纤维素透析袋:

      此类型透析袋可耐受pH范围是2.0~12.0;耐受温度是4~60℃;不能煮,也不需要煮,只需用纯水彻底冲洗即可。

      3.纤维素透析袋:

      此类型透析袋可耐受pH范围是2.0~9.0;耐受温度是4~37℃;不能煮,也不需要煮,只需用纯水彻底冲洗即可。

      三、透析袋的选择

      1.确定透析袋的分子量

      在选择适合截留分子量之前,首先要明确:欲保留在透析袋中的样品和想要除去的杂质的分子量。

      2.选择普通型,再生型,or纤维素透析袋

      确定好分子量之后,根据实际情况,样品溶剂等,选择透析袋

      3.正确选择扁平宽度

      透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快;较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用,建议使用总长(包括闭合夹和顶部空间)为大约10-15cm的透析袋。

      四、透析袋的使用

      下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量,透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率,因此,一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化

      a.把适量的透析液(缓冲液)加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。(例如:在一升透析液中透析10毫升的样品)

      b.裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度(约占总样品体积量的20%)作为头部空间

      c.把透析管插入打开的透析夹,在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住。不要折叠透析袋

      d.由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度,夹紧透析夹

      e.把透析样品放在合适的透析缓冲液中

      f.透析要根据具体的应用需求。通常情况下,允许过夜透析。在持续透析的过程中,至少要进行3次全部更换透析液。建议在(透析后)2-4小时,6-8小时和10-14小时(第2天早晨)更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。

      五、使用注意事项

      a.透析袋不能在纯水中长期储存,会长菌,用0.05%die氮化钠溶液储存

      b.样品按推荐的单位长度容量加样,不可多加,样品浓度不可太大,否则容易导致膜涨破

      c.样品和透析液体积比一般是1:50~500

      d.对于高浓度污染物,样品可能需要较长的时间透析,透析液需要更频繁的更换。

      e.透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃,再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。

      六、使用注意事项

      在适当的储存情条件下,保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或4℃储存在聚yi烯袋中。一旦变湿,透析袋应浸泡在下列之一的溶液中:0.05%die氮化钠,1%苯jia酸钠或1%甲醛。(备注:一旦变潮湿,不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌)

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