产品分类
您现在的位置:首页 > 技术文章 > 关于细胞样的保存
关于细胞样的保存
  • 发布日期:2020-06-12      浏览次数:103
    • 一、操作步骤:

       

      1、在37℃ 5% CO2条件下将细胞加在处理的载玻片上,用培育基培育,时间通过预试验确定;

       

      2、细胞长好后,用洗刷液洗2分钟×3次,室温下将其放入细胞固定液中固定30-60min,蒸馏水洗刷;

       

      3、室温下用洗刷液充沛洗刷固定细胞,(干燥后-20℃冰冻保存2周以上)

       

      4、杂交前将固定的细胞进行如下处理;顺次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脱水每次
      5min,用二甲苯洗刷,除掉残留脂质顺次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,进行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;

       

      5、在37℃用胃蛋白酶溶液10min处理固定的细胞,以增加细胞对大分子试剂的通透性,再用洗刷液洗5min;

      6、用1%甲醛固定10min,用洗刷液洗净。

       

      二、留意:

         
      1、所有溶液都必须用RNA酶抑制剂处理。
          

      2、操作中重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。

    客户至上 用心服务
    在线客服