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一步解决细胞培养板选择困扰全程干货
  • 发布日期:2020-11-30      浏览次数:911
    • 细胞培养板作为培养细胞的一种常用和重要的工具,形状、规格、用途多样,你是否也为如何选择适合的培养板而迷茫?你是否正为如何方便、正确的使用培养板而苦恼?你对如何处理培养板是否也有困惑?对不同的培养板各有什么妙用你又有何体会?

       

      细胞培养板依底部形状的不同可分为平底和圆底(U 型和V 型);培养孔的孔数有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根据材质的不同有 Terasaki 板和普通细胞培养板。具体选择时根据培养细胞的类型、所需培养体积及不同的实验目的而定。

       

      平底和圆底(U型和V型)培养板的区别和选择

       

      不同形状的板子自然有不同用途。平底的什么类型的细胞都可用,但当细胞数目较少,如做克隆时,就用 96 孔平底板;另外,做 MTT 等实验时,无论贴壁和悬浮细胞,一般均用平底板。这样便于镜下观测、有明确的底面积、细胞培养液面高度相对一致,还便于 MTT 检测。

       

      至于 U 或 V 型板,一般在某些特殊要求时才使用。如在免疫学方面,当做两种不同淋巴细胞混合培养时,需要二者相互接触以刺激。因此,一般需要 U 型板,因细胞会由于重力的作用而聚集在一个很小的范围内。V 型板的用途更少,一般用于细胞杀伤实验时,为了使效靶细胞紧密接触,常使用 V 型板,但这种实验也可用 U 型板替代(加入细胞后﹐低速离心)。除此之外,圆底还可以拿來做分析、化学反应、同位素掺入的实验或是保存样品用。

       

      孔数的选择

       

      流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,细胞爬片一般用 24 孔等,要具体根据你的实验来定。

       

       

      Terasaki 板和普通细胞培养板的区别

       

      Terasakiplate 主要是用于晶体学研究,产品设计便于对晶体的观察与结构分析。有 sitting 和 handing drop 两种方法。两种方法应用产品的外形结构也不同,材料上选择 crystal class polymer,特殊的材料有利观察晶体结构。

       

      细胞培养板主要材料是 treated sufface,便于细胞贴壁生长与伸展。当然还与浮游细胞的生长材料,降低结合表面积有关,取决于实验材料上的应用与对材料的选择。

       

      细胞培养板与酶标板的区别

       

      用多孔细胞培养板测吸光度肯定可以,可以用它来做样品的蛋白定量和 MTT 检测。

       

      区别:酶标板一般要比细胞培养板贵,细胞板主要做细胞培养,但也可以用来测蛋白浓度;酶标板包括包被板和反应板,一般不能用做细胞培养,它主要做免疫酶联反应后的蛋白检测,它需要更高的要求还需要特定的酶标工作液。

       

      常用不同培养板的孔底面积及推荐加液量

       

      不同孔板所加培养液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范围,结合不同孔的底面积就可算出各培养孔的适宜加液量。若加液量过多会影响气体(氧气)交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染。具体所加细胞密度依实验的目的不同灵活掌握。

      培养器皿

      面积(cm2

      培养液量(ml)

      细胞量

      96 孔培养板

      0.32

      0.1

      105

      24 孔培养板

      2

      1.0

      5×105

      12 孔培养板

      4.5

      2.0

      106

      6 孔培养板

      9.6

      2.5

      2.5×106

      3.5 cm 培养皿

      8

      3.0

      2×106

      6 cm 培养皿

      21

      5.0

      5.2×106

      10 cm 培养皿

      55

      10.0

      13.7×106

      25 cm2 培养瓶

      25

      5.0

      5×106

      75 cm2 培养瓶

      75

      15~30

      2×107