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组织冰冻切片包埋剂简介
  • 发布日期:2023-01-06      浏览次数:585
    • 使用前标本准备:

      冰冻切片标本可采用 (1) 新鲜组织,特点是快速,但未用完的包埋组织块不能保存;(2) 使用经典方法10%甲醛或4%多聚甲醛室温2~10分钟固定过的组织,优点是既不影响后续步骤,包埋组织块又可长期冰冻保存,随时再用,缺点是步骤稍繁。(3) 培养细胞,800g离心10分钟收集培养细胞,用吸头或针头拨出细胞沉淀块,放入OCT包埋剂内。

      应避免采用降低组织冰点的甲醇乙醇固定。本产品说明书不提供关于组织取材、渗透、固定、冰冻切片等技术信息。用户应阅读冰冻切片机操作手册,参考各种常规技术方法。

       

      使用方法:

      1. OCT包埋:用水或PBS冲洗固定的组织块,用吸水纸吸去液体。在盛标本的包埋模子内,挤出适量的包埋剂,放入组织和细胞沉淀块,加包埋剂wanquan埋没组织块。可用2层铝箔纸折叠成简易的模子。如有气泡可用针头或吸头吸出。

      2. 冰冻:将盛有组织细胞和包埋剂的模子,正置于切片机冷室内冰冻10分钟。此时,包埋剂为乳白色固体。包埋剂和组织冷冻时体积略有膨胀,因此模子应正置,由底部向顶部进行冰冻。也可将OCT包埋的组织置于干冰或液氮,或放入-40~-70 ºC冰箱冰冻固化保存,用前取出置于切片机冷室内平衡温度(否则损坏刀)

      3.切片:可在切片机的组织卡盘(chuck)上加少许包埋剂并在其固化前嵌入组织块,然后再于组织周围加入少许包埋剂使其稳定。进行常规切片,厚度范围2~100 µm。

      4. 收片后,用适量水或PBS冲洗切片3次,每次2−3分钟,洗除包埋剂。而后可进行常规组化染色、病理染色、原位杂交。未用完的组织块可冷冻储存。