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影响ELISA试剂盒测定成果的解决办法
  • 发布日期:2024-06-06      浏览次数:64
    • 一、类风湿因子
      人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)能够与ELISA系统中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合,然后导致假阳性。
      解决办法:
      1.用F(ab)2替代完好的IgG;
      2.标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有用);
      3.检测抗原时,能够用2-巯基yi醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。
      二、补体
      ELISA系统中固相一抗和符号二抗过程中,抗体分子发作变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 能够将二者连接起来,然后形成假阳性。
      解决办法:
      1.用EDTA稀释标本;
      2.用53℃,10 min或56℃,30 min加热血清使C1q灭活。
      三、嗜异性抗体
      人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能形成假阳性。
      解决办法:
      可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s),但加入量不足或亚类不同时无效。
      四、嗜靶抗原的本身抗体
      抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的本身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定成果。
      解决办法:
      测定前需用理化方法将其解离后再测定。