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PVDF膜转印膜要如何使用
  • 发布日期:2025-06-26      浏览次数:78
    • PVDF膜即聚偏二氟乙/烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。

      PVDF本质是一种疏水性的聚合物,在水溶液中不会浸湿,为了在水性缓冲液和系统中使用PVDF膜,首先必须将其浸泡在50%(v/v)或更高浓度的醇溶液中。

      PVDF膜在使用时需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。

      甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。

      随着膜的外观从不透明到半透明,浸湿是显而易见的。之后必须用水反复冲洗以去除醇类,经预处理的膜可以直接放入转印缓冲液中平衡。

      一旦膜被浸湿,蛋白结合可通过蛋白与膜的接触而实现。

      由于蛋白与膜的结合贯穿整个膜的厚度(深度),结合能力是由孔的内部表面积来决定的,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。

      0.2um PVDF膜内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍,使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的,一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。