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ELISA试剂盒是如何进行标本处理的?
  • 发布日期:2021-06-27      浏览次数:206
    •   ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中产品水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成后的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度,通过标准曲线计算样品中产品浓度。
       
        适用领域:
        1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
        2、研究抗酶抗体的合成。
        3、显现微量的免疫沉淀反应。
        4、定量检测体液中抗原或抗体成份。
       
        国产ELISA试剂盒的性能:
        1、灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
        2、特异性:不与其它细胞因子反应。
        3、重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
       
        ELISA试剂盒的标本处理:
        1、本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本;
        2、实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2);
        3、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本;
        4、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差;
        5、若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况;
        6、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出;
        7、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
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