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关于纤维素 DE-52的处理只需要简单的几步
  • 发布日期:2022-03-29      浏览次数:169
    •   纤维素 DE-52为中等碱性阴离子交换剂,柱层析用于吸附剂,用以分离提纯多糖、肽、核苷酸、酶、血清组分和病毒等各种生物高分子。
       
        纤维素DE-52提取法纯化多克隆抗体
        该法提取IgG简便,既可小量提取,也可大量制备。
        1、批量提取法,称取DEAE-纤维素(DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。将水分抽干,或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤,收集湿纤维素,以降低其离子强度。按1ml血清加湿重5g DE52,经过充分搅拌,置4℃吸附1h。上清液可再如此处理一次,即获得较纯的IgG。该法提取IgG简便,既可小量提取,也可大量制备。
        2、Tris-Cl离子交换层析法。
       
        纤维素 DE-52处理方法:
        关于纤维素 DE-52的处理只有简单的几步,如下:
        1、先将干粉的纤维素浸泡在蒸馏水中,一段时间大约3小时左右,我偏爱这个时间,去除杂质,抽干一下。
        2、再用0.5mol/l的HCl溶液浸泡2小时,用去离子水洗净至PH中性,并抽干。
        3、将抽干的纤维素再浸泡在0.5mol/l的NaOH溶液中2小时,用去离子水洗至中性,抽干。即可用了。
        对于用过的纤维素,可以重复利用多次,但需要经过再生处理后才可以使用。再生处理可先用高浓度NaCl(1-2 mol/L)过柱冲洗柱床,以除去纤维素 DE-52阴离子交换纤维所吸附的成份。然后,再用0.5 mol/L的HCl和NaOH处理,处理方法与预处理完全相同。
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